Floresan mikroskopiyasi biologik namunalarni ko'rish va o'rganish qobiliyatimizni inqilob qildi, bu bizga hujayralar va molekulalarning murakkab dunyosiga kirishga imkon berdi. Floresan mikroskopining asosiy komponenti namunadagi lyuminestsent molekulalarni qo'zg'atish uchun ishlatiladigan yorug'lik manbai. Yillar davomida turli xil yorug'lik manbalari qo'llanildi, ularning har biri o'ziga xos xususiyatlar va afzalliklarga ega.
1. Merkuriy chiroq
50 dan 200 vattgacha bo'lgan yuqori bosimli simob chiroq kvarts oynasi yordamida qurilgan va sharsimon shaklga ega. Uning ichida ma'lum miqdorda simob mavjud. U ishlaganda ikkita elektrod o'rtasida zaryadsizlanish paydo bo'lib, simob bug'lanishiga olib keladi va sferadagi ichki bosim tezda oshadi. Bu jarayon odatda 5 dan 15 minutgacha davom etadi.
Yuqori bosimli simob chiroqning emissiyasi elektrodni tushirish vaqtida simob molekulalarining parchalanishi va kamayishi natijasida yorug'lik fotonlarining chiqishiga olib keladi.
U kuchli ultrabinafsha va ko'k-binafsha nurlar chiqaradi, bu uni turli xil lyuminestsent materiallarni hayajonlantirish uchun mos qiladi, shuning uchun u floresan mikroskopiyada keng qo'llaniladi.
2. Ksenon lampalar
Floresan mikroskopida keng tarqalgan boshqa oq yorug'lik manbai ksenon chiroqdir. Ksenon lampalar, simob lampalar kabi, ultrabinafshadan yaqin infraqizilgacha to'lqin uzunligining keng spektrini ta'minlaydi. Biroq, ular qo'zg'alish spektrlari bilan farqlanadi.
Simob lampalar o'z emissiyasini yaqin ultrabinafsha, ko'k va yashil hududlarda to'playdi, bu yorqin lyuminestsent signallarni yaratishni ta'minlaydi, ammo kuchli fototoksiklik bilan birga keladi. Shunday qilib, HBO lampalari odatda sobit namunalar yoki zaif floresan ko'rish uchun ajratilgan. Bundan farqli o'laroq, ksenon chiroq manbalari silliqroq qo'zg'alish profiliga ega bo'lib, turli to'lqin uzunliklarida intensivlikni taqqoslash imkonini beradi. Bu xususiyat kaltsiy ionlari konsentratsiyasini o'lchash kabi ilovalar uchun foydalidir. Ksenon lampalar, shuningdek, yaqin infraqizil diapazonda, ayniqsa 800-1000 nm atrofida kuchli qo'zg'alishni namoyish etadi.
XBO lampalari HBO lampalariga nisbatan quyidagi afzalliklarga ega:
① Bir xil spektral intensivlik
② Infraqizil va o'rta infraqizil hududlarda kuchliroq spektral intensivlik
③ Ko'proq energiya chiqishi, ob'ektiv diafragmaga erishishni osonlashtiradi.
3. LEDlar
So'nggi yillarda flüoresan mikroskopi yorug'lik manbalari sohasida yangi da'vogar paydo bo'ldi: LEDlar. LEDlar millisekundlarda tez yoqish-o'chirish afzalligi, namunaning ta'sir qilish vaqtini qisqartirish va nozik namunalarning ishlash muddatini uzaytirish imkonini beradi. Bundan tashqari, LED yorug'lik tez va aniq parchalanishni namoyish etadi, bu uzoq muddatli jonli hujayra tajribalarida fototoksiklikni sezilarli darajada kamaytiradi.
Oq yorug'lik manbalari bilan taqqoslaganda, LEDlar odatda torroq qo'zg'alish spektrida chiqaradi. Biroq, ko'p qirrali ko'p rangli lyuminestsent ilovalarga imkon beruvchi bir nechta LED diapazonlari mavjud bo'lib, LEDlarni zamonaviy floresan mikroskopiya sozlamalarida tobora ommalashib borayotgan tanlovga aylantiradi.
4. Lazerlarning yorug'lik manbai
Lazer yorug'lik manbalari juda monoxromatik va yo'naltirilgan bo'lib, ularni yuqori aniqlikdagi mikroskopiya uchun ideal qiladi, jumladan STED (Stimulyatsiyalangan emissiya depletion) va PALM (Fotoaktivlashtirilgan lokalizatsiya mikroskopiyasi) kabi o'ta aniqlikdagi texnikalar. Lazer nuri odatda maqsadli florofor uchun zarur bo'lgan o'ziga xos qo'zg'atuvchi to'lqin uzunligiga mos keladigan tarzda tanlanadi, bu floresan qo'zg'alishda yuqori selektivlik va aniqlikni ta'minlaydi.
Floresan mikroskopning yorug'lik manbasini tanlash maxsus eksperimental talablarga va namunaning xususiyatlariga bog'liq. Agar sizga yordam kerak bo'lsa, biz bilan bog'laning
Yuborilgan vaqt: 2023 yil 13-sentabr